該研究測序策略：構(gòu)建了涵蓋駱駝（21個組織）與牛（33個組織）的單細胞/單核轉(zhuǎn)錄組圖譜，并整合已發(fā)表的牛、羊、豬、小鼠及人多組織單細胞數(shù)據(jù)，開展跨物種比較分析。研究發(fā)現(xiàn)，駱駝不僅保留了與牛真胃同源的腺囊胃室，還演化出特有的血管平滑肌細胞，可能為其高效血壓調(diào)節(jié)提供細胞基礎。這項研究不僅為畜禽適應性進化提供新見解，也為人類代謝疾病研究提供了跨物種比較框架。百邁客生物為該研究提供了百創(chuàng)空間轉(zhuǎn)錄組BMKMANU?S1000服務。

研究背景

對多腔胃哺乳動物進行細胞與分子特征分析，有助于深入理解消化與代謝系統(tǒng)的進化機制。駱駝進化出了一套獨特的多室分布式消化策略，與牛的集中式消化模式形成鮮明對比。二者在消化與代謝系統(tǒng)中所展現(xiàn)的物種特異性細胞組成及分子特征差異，這引出了一個關(guān)鍵的科學問題：多腔胃動物適應性進化的細胞基礎是什么？

研究結(jié)果

? 駱駝與牛的單細胞轉(zhuǎn)錄組圖譜構(gòu)建

該研究對駱駝的21種組織（160,682個細胞）和牛的33種組織（264,472個細胞）進行了單細胞RNA測序（scRNA-seq）或單核RNA測序（snRNA-seq），共注釋出124種細胞類型，其中59種為駱駝和牛所共有。基于鑒定出的15,324個直系同源基因，研究者整合了兩個物種的單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行分析。結(jié)果顯示，肝細胞、內(nèi)皮細胞、免疫細胞和上皮細胞在物種間表現(xiàn)出較高的相似性，而生殖細胞的相似性較低，這可能與其作為進化速率最快的細胞類型有關(guān)。本結(jié)果系統(tǒng)揭示了駱駝多種組織的細胞類型組成，并刻畫了兩種物種間對應細胞類型的保守性與異質(zhì)性。

圖1. 細胞圖譜構(gòu)建

? 多腔胃結(jié)構(gòu)細胞的異質(zhì)性分析

多腔胃是駱駝和牛高度特化消化道的標志性特征。為探究駱駝與牛胃腔中細胞類型組成及其基因表達模式的保守性與差異性，作者針對胃腔單細胞數(shù)據(jù)集進行分析，通過比較胃部結(jié)構(gòu)性細胞，發(fā)現(xiàn)上皮細胞的聚類由組織來源決定，而非物種。

駱駝腺囊（GS）與第三胃室（C3）識別出一個獨特的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)模塊，其中包含SOX8、UNCX等調(diào)控因子，促進細胞增殖與遷移。駱駝GS與真胃具有共同起源，但已獲得獨特的特化特征。保守的細胞和分子特征使GS在發(fā)育過程中能夠執(zhí)行類似真胃的核心功能。同時，GS與C3中以高表達促增殖和遷移基因為特征的獨特上皮亞型，代表了關(guān)鍵的譜系特異性創(chuàng)新。

因此，作者提出GS從共同的祖先胃結(jié)構(gòu)演化而來，隨后在駱駝中經(jīng)歷特定特化過程，這一過程可能由這些新型細胞類型驅(qū)動，以支持其獨特的器官發(fā)生和功能維持。駱駝第一胃室（C1）上皮缺乏乳頭結(jié)構(gòu)，正向選擇基因的細胞偏向性表達模式表明，自然選擇在塑造駱駝和牛C1上皮細胞的特征。C1上皮的細胞類型具有保守性，且成纖維細胞是三種物種中形成C1上皮乳頭狀結(jié)構(gòu)差異的主要細胞類型。

圖2.?多室胃結(jié)構(gòu)細胞的跨物種比較分析

? 駱駝與牛對營養(yǎng)吸收與代謝的偏好研究

為評估前胃特化對植物性飼料利用的影響，作者提取了駱駝和牛的小腸及肝臟單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行跨物種比較。

結(jié)果表明，駱駝肝細胞高表達脂酸代謝基因（如ACSL4、ACSL5、ACOX1）和PPAR信號通路相關(guān)基因，顯示出更強的脂質(zhì)轉(zhuǎn)化與儲存能力；而牛肝細胞則高表達藥物代謝和淀粉蔗糖代謝基因，可能更適應飲食波動及飼料中的外源性物質(zhì)處理。

在腸道方面，牛腸上皮細胞中有機鹽轉(zhuǎn)運基因上調(diào)，利于吸收瘤胃微生物產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸；駱駝腸細胞則高表達水通道蛋白基因，與其干旱適應機制相符。這些發(fā)現(xiàn)共同表明，駱駝與牛在營養(yǎng)吸收與代謝方面存在明顯差異，且駱駝肝臟在長鏈脂肪酸代謝上更具優(yōu)勢，可能有助于避免過度脂肪沉積。

圖3. 駱駝與牛肝臟、小腸單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)比較

? 腎臟血管平滑肌細胞（VSMCs）異質(zhì)性分析

為探究與駱駝腎臟獨特功能相關(guān)的主要細胞類型及其分子特征，作者聚焦于駱駝腎臟的單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，鑒定出一類特殊的血管平滑肌細胞，并將其命名為S100A4+VSMCs。該細胞高表達血管緊張素II受體基因AGTR1，而收縮相關(guān)基因（如MYH11）表達較低。比較分析顯示，S100A4+VSMCs未在小鼠、豬、牛及人等哺乳動物的腎臟中被發(fā)現(xiàn)，表明其可能為駱駝所特有。

作者進一步采集駱駝腎臟組織進行空間轉(zhuǎn)錄組學分析，證實了S100A4+VSMCs在腎臟中的實際存在，并發(fā)現(xiàn)其主要分布于腎小球的入球與出球小動脈區(qū)域。與典型的收縮型VSMCs相比，S100A4+VSMCs被預測具有更高的分化程度。通過受體?配體共定位分析，研究提示這兩類血管平滑肌細胞亞型之間存在直接相互作用，且可能通過DLK1?NOTCH3信號軸介導。S100A4+VSMCs可能通過調(diào)節(jié)腎小球入球與出球小動脈對血管緊張素II的局部反應，在血壓調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。

圖4. 駱駝腎臟中S100A4+VSMCs的鑒定

研究總結(jié)

該研究構(gòu)建了駱駝與牛的多組織單細胞轉(zhuǎn)錄組圖譜，并提供了駱駝腎臟的空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，為解析物種特異性生物學特征及其進化歷程提供了重要資源?；谖?、腎臟及肝臟等關(guān)鍵消化代謝器官的跨物種比較，研究不僅驗證了駱駝胃部的起源假說，還揭示了特定細胞類型的基因表達變化如何幫助駱駝肝臟避免過度脂肪沉積。

此外，作者在駱駝腎臟中發(fā)現(xiàn)了一類新型血管平滑肌細胞，該細胞可能在腎臟適應干旱、高鹽環(huán)境的過程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。綜上所述，該研究從分子與細胞層面闡釋了駱駝適應性進化的內(nèi)在機制，為理解哺乳動物器官系統(tǒng)的進化與功能多樣化提供了新的視角。

該研究通過創(chuàng)新的數(shù)據(jù)整合方法，將深度單細胞RNA測序數(shù)據(jù)與空間基因表達數(shù)據(jù)相結(jié)合，首次實現(xiàn)了在大麥組織中以細胞分辨率解析超過40,000個基因的表達圖譜。該研究揭示了大麥從分生組織及器官起始細胞命運決定到特定花器官起始過程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄事件與時空軌跡，闡明了大麥花序和花器官發(fā)育的遺傳調(diào)控基礎，為未來精準定向改良大麥農(nóng)藝性狀提供了全新的研究工具和理論基礎，具有重要的科學意義和應用價值。百邁客生物為該研究提供了轉(zhuǎn)錄組測序服務。

研究背景

禾本科植物的花序是復合結(jié)構(gòu)，包含一系列作為干細胞巢的分生組織。這些分生組織在身份和壽命上各不相同，產(chǎn)生分支或分裂形成最終產(chǎn)生種子的花分生組織。在分生組織內(nèi)部，特定的細胞類型由位置信息和基因調(diào)控網(wǎng)絡的區(qū)域性活性所決定。然而，目前的技術(shù)難以獲取基因表達譜的精確時空信息，從而限制了對這些局部微環(huán)境及復雜發(fā)育過程的理解。盡管已有一些單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)可用于禾本科物種，但要推斷復雜組織內(nèi)細胞的起源和命運，仍需依賴已知標記基因的表達譜進行間接推測。

研究結(jié)果

深度單細胞RNA測序數(shù)據(jù)

本研究首先通過深度單細胞RNA測序（scRNA-seq）技術(shù)，分析了參考品種“Golden?Promise”在特定發(fā)育階段的營養(yǎng)莖尖分生組織和幼穗細胞，獲得了超過16,000個高質(zhì)量單細胞的轉(zhuǎn)錄組信息，出于實驗設計嚴謹?shù)目紤]，通過比較完整組織和原生質(zhì)體組織的bulk?RNA-seq數(shù)據(jù)去除了原生質(zhì)體分離過程中誘導產(chǎn)生的差異基因，并鑒定出代表維管束、原套、內(nèi)體層和分裂細胞等不同譜系的細胞集群。

圖1. 大麥發(fā)育尖端的器官形成

空間基因表達數(shù)據(jù)

然后，研究進一步通過高分辨率多重單分子RNA熒光原位雜交技術(shù)，在組織切片上以納米級精度定位和定量了86個已知或預測標記基因的表達，并構(gòu)建了空間表達矩陣。最終，研究者開發(fā)了一種定制化的數(shù)據(jù)插補方法，將空間有限的smRNA-FISH數(shù)據(jù)作為錨點，與全面的scRNA-seq數(shù)據(jù)集進行整合，成功地預測了組織切片上所有48,904個大麥基因在每個細胞中的表達水平，并構(gòu)建了用戶友好的在線圖譜BARVISTA。這一系列工作說明，整合單細胞與空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)能夠以前所未有的時空分辨率重建大麥分生組織發(fā)育的動態(tài)基因表達圖譜。

圖2. 植物SAM中原基形成和分生組織結(jié)構(gòu)的模型，以及發(fā)育中的花序示意圖

研究總結(jié)

該研究的核心意義在于成功開發(fā)并驗證了一種可靠的數(shù)據(jù)整合與插補策略，彌補了當前空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)通量有限和單細胞測序缺乏空間信息的鴻溝。所構(gòu)建的BARVISTA在線數(shù)據(jù)庫和虛擬顯微切割工具，使研究人員能夠直觀地探索大麥發(fā)育過程中的基因表達模式，并精準解析特定細胞群體的表達特征。這項成果不僅為深入理解植物分生組織維持、器官起始和花發(fā)育的基因調(diào)控網(wǎng)絡提供了強大框架，也為分子層面精準表征復雜突變體表型、鑒定關(guān)鍵調(diào)控因子開辟了新途徑。

以上內(nèi)容來源于iPlants，侵刪

糖尿病性血管病變是2型糖尿?。═2DM）的一種主要并發(fā)癥，其發(fā)病機制與血管功能障礙、代謝重編程以及氧化應激有關(guān)。位于細胞核內(nèi)的NAD?依賴性去乙?；窼IRT6，因其通過組蛋白去乙?；饔脕碚{(diào)節(jié)心血管和代謝穩(wěn)態(tài)而受到關(guān)注。然而，T2DM中細胞質(zhì)SIRT6的積累及其功能和機制仍需進一步闡明。

單細胞轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果表明：Ⅱ型糖尿病主動脈經(jīng)歷了顯著的病理重塑，其特征是VSMС過度增殖、從收縮狀態(tài)向合成狀態(tài)的表型轉(zhuǎn)換以及遷移能力增強。

通過轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學分析，研究確定蛋白去乙酰化過程是導致糖尿病血管病變的重要誘因。進一步研究發(fā)現(xiàn)，使用高糖高棕櫚酸處理血管平滑肌細胞后，SIRT6以Importin13（IPO13）的依賴方式從細胞核向細胞質(zhì)轉(zhuǎn)位。糖酵解異常是糖尿病性血管病變的關(guān)鍵誘因。

該研究旨在探究細胞質(zhì)中的SIRT6是否對糖尿病性血管病變中的糖酵解過程起到調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，SIRT6通過與ENO3（一種催化2-PGA轉(zhuǎn)化為PEP的關(guān)鍵糖酵解酶）相互作用，從而去乙?；疭IRT6，從而降低了其活性，進而加劇了在高血糖和高血脂條件下發(fā)生的糖酵解重編程過程。

H?S是一種氣體信號分子，主要通過半胱氨酸殘基的巰基硫化修飾作用來調(diào)節(jié)底物蛋白的功能。研究發(fā)現(xiàn)H?S通過靶向SIRT6起到了改善糖酵解重編程的作用。在穩(wěn)態(tài)狀態(tài)下，H?S對維持各種器官的生理功能至關(guān)重要，并且內(nèi)源性H?S水平與許多生物活動相關(guān)，例如糖尿病和代謝失調(diào)。

在該研究中，H?S減緩了血管平滑肌細胞的增殖以及收縮合成表型的轉(zhuǎn)變。我們認為其潛在機制可能涉及多種途徑。一方面，H?S減少了活性氧的生成；另一方面，它增強了SIRT6在C141位點的硫巰基化修飾。作者證實SIRT6保守活性中心的C141位點是H2S調(diào)節(jié)SIRT6功能的關(guān)鍵靶點。

綜上所述，胞質(zhì)SIRT6通過促進病理性糖酵解參與糖尿病血管重塑。其中SIRT6在Importin 13（IPO13）介導下由核轉(zhuǎn)位至胞質(zhì)。進一步研究發(fā)現(xiàn)，胞質(zhì)內(nèi)積聚的SIRT6與糖酵解關(guān)鍵酶烯醇化酶3（ENO3）發(fā)生直接相互作用，促進ENO3去乙?；鰪娤掠瘟姿嵯┐际奖幔≒EP）生成，從而誘導糖酵解重編程，最終導致糖尿病血管病變的病理性改變。此外，外源性硫化氫（H?S）通過誘導SIRT6第141位半胱氨酸發(fā)生S-巰基化修飾，阻斷SIRT6-ENO3相互作用，抑制病理性糖酵解并減輕VSMC過度增殖。該研究提出的SIRT6-ENO3信號軸通過調(diào)控血管糖酵解重編程參與糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展，為靶向胞漿SIRT6作為糖尿病血管并發(fā)癥的潛在治療策略提供了新的理論依據(jù)。

總體而言，該研究通過整合多組學分析、動物模型驗證和細胞功能實驗，全面揭示了細胞質(zhì)SIRT6-ENO3軸調(diào)節(jié)糖酵解重編程和VSMC增殖相關(guān)血管重塑的新機制。研究發(fā)現(xiàn)高血糖和高血脂通過氧化應激和IPO13依賴的核輸出過程促進SIRT6細胞質(zhì)易位，易位的SIRT6通過去乙?；疎NO3增強其酶活性，驅(qū)動糖酵解重編程和血管平滑肌細胞異常增殖。更重要的是，外源性硫化氫通過恢復SIRT6第141位半胱氨酸的S-硫氫化修飾，抑制其細胞質(zhì)易位并減弱ENO3活性，從而改善糖尿病血管病變。

這項研究首次闡明了細胞質(zhì)SIRT6在糖尿病血管病變中的病理作用，為理解糖酵解重編程與血管重塑的分子聯(lián)系提供了重要理論依據(jù)。該發(fā)現(xiàn)不僅豐富了對SIRT6功能多樣性的認識，更為開發(fā)針對糖尿病血管并發(fā)癥的新型治療策略開辟了重要途徑。特別是硫化氫作為內(nèi)源性保護因子的作用機制解析，為臨床轉(zhuǎn)化應用提供了有力支撐，有望為改善糖尿病患者血管功能和預后帶來新希望。

參考文獻

[1]?K.?P.?Zucatti,?P.?P.?Teixeira,?L.?F.?Wayerbacher,?G.?F.?Piccoli,?P.?E.?Correia,?N.?K.?O.?Fonseca,?et?al.,?Long-term?Effect?of?Lifestyle?Interventions?on?the?Cardiovascular?and?All-Cause?Mortality?of?Subjects?With?Prediabetes?and?Type?2?Diabetes:?A?Systematic?Review?and?Meta-analysis,Diabetes?Care.45?(2022)?2787-2795.

[2]?J.?Xie,?M.?Wang,?Z.?Long,?H.?Ning,?J.?Li,?Y.?Cao,?et?al.,?Global?burden?of?type?2?diabetes?in?adolescents?and?young?adults,?1990-2019:?systematic?analysis?of?the?Global?Burden?of?Disease?Study?2019,Bmj.379?(2022)?e072385.

[3]?J.?Shi,?Y.?Yang,?A.?Cheng,?G.?Xu,?F.?He,?Metabolism?of?vascular?smooth?muscle?cells?in?vascular?diseases,Am?J?Physiol?Heart?Circ?Physiol.319?(2020)?H613-h631.

[4]?S.?H.?Cao,?R.?Y.?Ma,?T.?Cao,?T.?Hu,?S.?Yang,?Z.?Y.?Ren,?et?al.,?PKM2?crotonylation?reprograms?glycolysis?in?VSMCs,?contributing?to?phenotypic?switching,Oncogene.?(2025).

[5]?M.?O.?J.?Grootaert,?A.?Finigan,?N.?L.?Figg,?A.?K.?Uryga,?M.?R.?Bennett,?SIRT6?Protects?Smooth?Muscle?Cells?From?Senescence?and?Reduces?Atherosclerosis,Circ?Res.128?(2021)?474-491.

[6]?Q.?J.?Wu,?T.?N.?Zhang,?H.?H.?Chen,?X.?F.?Yu,?J.?L.?Lv,?Y.?Y.?Liu,?et?al.,?The?sirtuin?family?in?health?and?disease,Signal?Transduct?Target?Ther.7?(2022)?402.

[7]?D.?Sun,?S.?Chen,?S.?Li,?N.?Wang,?S.?Zhang,?L.?Xu,?et?al.,?Enhancement?of?glycolysis-dependent?DNA?repair?regulated?by?FOXO1?knockdown?via?PFKFB3?attenuates?hyperglycemia-induced?endothelial?oxidative?stress?injury,Redox?Biol.59?(2023)?102589.

[8]?R.?Gupta,?M.?Sahu,?R.?Tripathi,?R.?K.?Ambasta,?P.?Kumar,?Protein?S-sulfhydration:?Unraveling?the?prospective?of?hydrogen?sulfide?in?the?brain,?vasculature?and?neurological?manifestations,Ageing?Res?Rev.76?(2022)?101579.

以上內(nèi)容來源于BioArtMED，侵刪

研究背景

胎生是脊椎動物中廣泛存在的一種生殖策略，其特征為受精卵在母體內(nèi)發(fā)育，直至胚胎發(fā)育成熟后才被產(chǎn)出。與這一普遍模式形成鮮明對比的是，海馬科物種演化出了極為特殊的“雄性懷孕”現(xiàn)象，該獨特的生命史策略為研究動物生殖系統(tǒng)的演化提供了重要窗口：功能性相似的生殖方式究竟源于趨同的分子機制，抑或是通過同源通路或全新的細胞調(diào)控路徑實現(xiàn)？盡管已有比較基因組學研究初步揭示了該生殖方式轉(zhuǎn)變的遺傳背景，然而相關(guān)基因在特定細胞類型中的表達模式及其演化軌跡仍不清楚。

在結(jié)構(gòu)上，海馬育兒袋與有袋類動物的育兒袋具有一定相似性，并在功能上融合了羊膜動物子宮與胎盤的特點。在雄性懷孕過程中，其育兒袋內(nèi)層組織發(fā)生顯著肥大與血管化，形成一種被稱為“偽胎盤”的結(jié)構(gòu)，可執(zhí)行氣體交換與營養(yǎng)物質(zhì)傳遞等典型的胎盤功能。此外，海馬在進化過程中丟失了?foxp3?基因——該基因在哺乳動物中對調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）的發(fā)育與功能維持具有核心作用，這一遺傳缺失也引發(fā)了對其在懷孕過程中免疫耐受機制的特殊適應性的探討。

研究內(nèi)容和結(jié)果

對海馬育兒袋7個發(fā)育階段進行單細胞轉(zhuǎn)錄組測序，鑒定出14個細胞簇，分為四大主要細胞類型：上皮細胞（EPCs，9個簇）、成纖維細胞（FBs，2個簇）、免疫細胞（ICs，2個簇）和內(nèi)皮細胞（ENCs，1個簇）。細胞的空間分布對細胞間相互作用及其功能維持至關(guān)重要。

對妊娠早期胎盤囊進行空間轉(zhuǎn)錄組測序（測序平臺BMKMANU?S1000）發(fā)現(xiàn)，EPCs在胎盤囊的三層結(jié)構(gòu)中均呈現(xiàn)高豐度。其中，EPCs-II（高表達C型凝集素）在外層富集，可能暗示其在早期聚集外部吸附物或抑制表皮細菌方面發(fā)揮作用。相比之下，EPCs-III（tfa+）和EPCs-IV（gata1+）在內(nèi)層富集，與“鐵穩(wěn)態(tài)”、“細胞遷移”及“血管發(fā)育”相關(guān)，其在雄性妊娠胎盤形成過程中可能參與侵襲和血管化過程。作為細胞外基質(zhì)（ECM）的主要來源，F(xiàn)Bs存在于中間層，富集“膠原蛋白生成”，可能促進胎盤囊結(jié)構(gòu)形成和組織重塑。ICs則分散于三層結(jié)構(gòu)中，調(diào)控免疫穩(wěn)態(tài)。

基于scRNA-seq，scATAC-seq，空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)聯(lián)合分析，作者發(fā)現(xiàn)了具有干細胞潛能的”育兒袋上皮祖細胞（BEPCs）”。研究顯示，該類細胞在發(fā)育過程中與膠原蛋白基因呈現(xiàn)協(xié)同表達，并受到雄激素信號的強烈驅(qū)動。研究進一步證實，外源性雄激素處理可誘導雌性海馬形成育兒袋結(jié)構(gòu)。由此，雄激素受體及其調(diào)控的育兒袋上皮祖細胞作為觸發(fā)育兒袋器官生成的關(guān)鍵起始因子。

圖1?細胞圖譜構(gòu)建

在雄性妊娠期間，海馬卵囊內(nèi)層會發(fā)生顯著的形態(tài)學改變并呈現(xiàn)肥大，形成類似胎盤的組織結(jié)構(gòu)，在細胞譜系轉(zhuǎn)變過程中，多個海馬特異性基因（如pastn1、sp-chia）在偽胎盤形成中起關(guān)鍵作用。作者發(fā)現(xiàn)EPC-I（muc15）、EPC-I（cxcl14）和EPC-IV在人類中與絨毛外滋養(yǎng)層細胞（EVTs）及絨毛滋養(yǎng)層細胞（VCTs）具有高度相似的基因表達譜，海馬雄性妊娠和哺乳動物常規(guī)雌性妊娠的胎盤形成過程，可能具有趨同的細胞機制和調(diào)控基礎。海馬缺乏foxp3基因（哺乳動物中調(diào)控Treg細胞的關(guān)鍵基因），但可能通過其它免疫細胞（如cd4+il2rb+?Tregs?和巨噬細胞）維持對胚胎的免疫耐受。

圖2?海馬假胎盤形成與子宮重塑的單細胞轉(zhuǎn)錄組分析圖譜

通過跨物種比較基因組學與單細胞多組學分析發(fā)現(xiàn)，盡管存在物種特異性差異，海馬假胎盤中的多數(shù)細胞類型在轉(zhuǎn)錄組特征上高度近似于人類的滋養(yǎng)層細胞——后者在調(diào)控胎兒生長及母體妊娠適應中發(fā)揮關(guān)鍵作用。其中，EPCs-II型細胞兼具表皮分化特征與凝集素介導的黏附功能，其可能是卵囊演化起源的重要線索。

進一步研究表明，海馬育兒袋與哺乳動物子宮在細胞和遺傳層面具有顯著同源性。海馬與哺乳動物生殖系統(tǒng)所呈現(xiàn)的趨同進化現(xiàn)象，可能源于特定細胞類型通過趨同演化形成相似的轉(zhuǎn)錄特征，進而實現(xiàn)類似功能，最終推動胎生機制的形成。

圖3?細胞類型進化分析

研究總結(jié)

該研究通過細胞分子與發(fā)育生物學的多維度分析，深入解析其卵囊發(fā)育與妊娠過程中的細胞遺傳動態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，卵囊形成的關(guān)鍵在于一種具有干細胞潛能的“育兒袋上皮祖細胞”群體。體內(nèi)實驗證實，雄激素在卵囊形成中起主導作用。通過對其它動物的對比研究，作者揭示了海馬雄性親代撫育的早期進化機制，以及其細胞特征，存在與哺乳動物胎生動物相似的生命功能的趨同演化。

研究單位：西安交通大學基礎醫(yī)學院院長張保軍教授團隊

期刊名：cellular & molecular immunology

影響因子：21.8

樣本類型：8-12周齡小鼠

文章采用技術(shù)：空間轉(zhuǎn)錄組測序、單細胞RNA測序（scRNA-seq）

引言

在對抗感染和腫瘤的免疫戰(zhàn)場上，記憶?CD8+?T?細胞是守護機體的「長效衛(wèi)士」，?它們能快速識別再次入侵的病原體或癌細胞，發(fā)動強力攻擊。長久以來，樹突狀細胞（DC）被認為是主導記憶?T?細胞分化的核心「指揮官」。研究人員通過整合單細胞RNA測序（scRNA-seq）和空間轉(zhuǎn)錄（BMKMANU?S1000）技術(shù)，揭示了單核細胞才是調(diào)控記憶?CD8+?T?細胞分化的關(guān)鍵「操盤手」，其奧秘藏在「細胞接觸」與「分子信號」的雙重機制中。其中BMKMANU?S1000空間轉(zhuǎn)錄組學平臺大放異彩，成為揭CCR2+單核細胞促進記憶CD8+?T細胞分化的關(guān)鍵工具。

研究背景

CD8+?T細胞在適應性免疫中扮演著關(guān)鍵角色，能夠保護機體免受病原體感染和消除惡性細胞。當CD8+?T細胞識別到抗原后，會迅速增殖并分化為效應CD8+?T細胞和記憶CD8+?T細胞。效應CD8+?T細胞負責即時清除感染，而記憶CD8+?T細胞則提供長期保護，能夠在再次遇到相同抗原時迅速啟動免疫反應。然而，單核細胞（monocytes）作為重要的髓系免疫細胞，雖在炎癥遷移中作用明確，但其是否直接參與T細胞分化尚無定論。

研究策略

動物模型與樣本制備

實驗動物：優(yōu)先選擇8-12周齡的CD45.1+/CD45.2+及OT-I轉(zhuǎn)基因小鼠

樣本制備：脾臟單細胞懸液通過機械分離和紅細胞裂解（ACK緩沖液）制備

技術(shù)手段

• 流式細胞術(shù)分析

細胞分選：從感染LM-WT的小鼠脾臟中分選出cDCs、moDCs和單核細胞等抗原呈遞細胞（APCs）

細胞刺激與培養(yǎng)：將分選出的APCs與OVA肽段體外共孵育后，過繼轉(zhuǎn)移到已接受初始OT-I+?CD8+?T細胞的WT受體小鼠體內(nèi)，或與體外刺激的初始CD8+?T細胞共培養(yǎng)

表型檢測：通過流式細胞術(shù)檢測CD8+?T細胞的分化表型，包括記憶相關(guān)標記物（如cKit、Sca1、Bcl6、TCF1和Eomes）的表達

• 空間分辨轉(zhuǎn)錄組學

樣本處理：對感染第0天和第5天的小鼠脾臟組織進行切片，并進行H&E染色以確定組織形態(tài)學特征

空間轉(zhuǎn)錄組學分析：利用BMKMANU?S1000空間轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)對脾臟切片進行分析，揭示不同免疫細胞亞群在脾臟中的空間分布

數(shù)據(jù)整合：將scRNA-seq數(shù)據(jù)與空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)進行整合，通過Seurat等工具的FindTransferAnchors和TransferData函數(shù)，將scRNA-seq中識別的細胞類型映射到空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)中，實現(xiàn)細胞類型的空間定位

• 免疫熒光染色

樣本處理：對感染第0天和第5天的小鼠脾臟組織進行切片，并進行免疫熒光染色

抗體選擇：使用特異性抗體標記CD8+?T細胞、單核細胞（CCR2+）、樹突狀細胞（CD11c+）等關(guān)鍵細胞類型

結(jié)果分析：通過顯微鏡觀察并拍攝染色切片，分析不同細胞類型在脾臟中的共定位關(guān)系

• 生物信息學分析

差異基因分析：利用Wilcoxon秩和檢驗等統(tǒng)計方法，識別不同細胞亞群間的差異表達基因

通路富集分析：通過ClusterProfiler等工具對差異表達基因進行通路富集分析，揭示潛在的生物學過程

偽時間分析：利用Monocle3等工具構(gòu)建細胞分化軌跡的偽時間軸，分析CD8+?T細胞亞群在分化過程中的基因表達變化

研究結(jié)果

研究結(jié)果一：通過空間分辨轉(zhuǎn)錄組學繪制急性感染后脾組織的圖譜

為了研究免疫反應過程中不同免疫細胞的空間分布和CD8+?T細胞分化的調(diào)節(jié)機制，研究人員通過整合單細胞RNA測序（scRNA-seq）和BMKMANU?S1000空間轉(zhuǎn)錄組（ST）技術(shù)，分析了急性感染模型中脾臟免疫細胞的空間分布與CD8??T細胞分化機制。實驗采用OT-I轉(zhuǎn)基因小鼠模型，通過李斯特菌（LM-OVA）感染誘導免疫反應，關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)包括：1）脾臟形成7個功能集群（B細胞、T細胞、單核/巨噬細胞等）；2）感染后T/B細胞區(qū)擴大，APCs（B細胞、DC、巨噬細胞）在T細胞區(qū)外圍聚集；3）空間重組與T細胞分化（MP/TE亞群）顯著相關(guān)。多組學整合揭示了免疫微環(huán)境的動態(tài)調(diào)控機制，為理解感染中細胞互作提供了多組學視角。

研究結(jié)果二：急性感染期間效應和memoryCD8?T細胞分化軌跡不同

為了探索CD8+?T細胞分化的空間決定因素，特別是與近端細胞的相互作用，對于急性感染模型研究人員進行了亞群分析、分化路徑分析和功能驗證，結(jié)果表明在急性感染中，IFN反應型CD8+?T細胞和CD8+MP?細胞之間分化軌跡的不同意味著，效應和記憶CD8+?T細胞的命運決定于免疫反應的初始階段，而IFN應答和MP?CD8+?T細胞分別是效應和記憶CD8+?T細胞分化途徑的初始階段。

研究結(jié)果三：跨組織區(qū)域細胞亞群的鑒定和空間圖譜

為了研究脾臟免疫細胞在感染前后的動態(tài)變化，研究人員通過整合單細胞RNA測序（scRNA-seq）和BMKMANU?S1000空間轉(zhuǎn)錄組（ST）技術(shù)，進一步鑒定了供體和受體脾臟中的免疫細胞群。結(jié)果顯示：①細胞組成：從1.6萬細胞中鑒定出19類，包括CD8??T細胞亞群（如記憶前體和IFN反應性細胞）及髓系細胞。②動態(tài)變化：感染后第5天，T細胞區(qū)從以初始CD8+?T細胞為主轉(zhuǎn)為記憶前體和效應細胞主導，且單核細胞取代DC成為主要浸潤的髓系細胞。③功能提示：不同的APC和CD8+?T細胞之間的相互作用在免疫反應和CD8+?T細胞的分化中起著重要作用。

研究結(jié)果四：單核細胞和CD8+?MP細胞的抗原依賴性共定位

為了探索不同細胞類型之間潛在的細胞相互作用，研究人員通過評估特異性免疫細胞標記物的表達、免疫熒光染色及空間轉(zhuǎn)錄組分析，檢查了第0天和第5天脾臟中CD8+?T細胞和單核細胞的空間分布。結(jié)果顯示單核細胞和CD8+?MP細胞以抗原刺激依賴性的方式在空間上共定位，表明單核細胞可能對CD8+?MP細胞的分化有關(guān)鍵影響。

研究總結(jié)

CD8+T?細胞是適應性免疫的重要執(zhí)行者；特別是記憶CD8+?T細胞對強效和長期保護至關(guān)重要。CD8+?T細胞分化在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控機制已被廣泛研究。然而，人們對感染過程中效應和記憶CD8+?T細胞分化的空間要求仍然知之甚少。研究人員通過整合BMKMANU?S1000空間轉(zhuǎn)錄組（ST）技術(shù)和scRNA-seq技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了記憶CD8+?T細胞分化的新機制，該機制涉及單核細胞和CD8+?MP細胞之間的解剖學鄰近性和TGF-β信號傳導。該研究結(jié)果闡述了記憶CD8+?T細胞命運決定的新機制，并強調(diào)單核細胞作為關(guān)鍵的APC群體，通過細胞間接觸依賴的方式在感染過程中促進記憶CD8+?T細胞的分化。

這是最早關(guān)于人類免疫學應用的記錄。公元前?400?年，中國可能已有人痘苗接種預防天花的方法，到?16?世紀明朝隆慶年間，人痘接種法得到重大改進并廣泛應用，17?世紀傳入俄國、朝鮮、日本、土耳其和英國等國家，至18世紀末結(jié)束經(jīng)驗免疫學時期，隨后免疫學又經(jīng)歷了經(jīng)典免疫學時期，近代免疫學時期，直到1965年/1968年?B細胞/T細胞的發(fā)現(xiàn)開啟了現(xiàn)代免疫學時期。

隨著免疫學的逐步發(fā)展，免疫組學技術(shù)也隨之進入了迅速發(fā)展的時期，先后發(fā)展出了標記免疫組技術(shù)、免疫組化技術(shù)、Bulk?T/BCR測序技術(shù)以及近幾年興起的單細胞T/BCR測序技術(shù)，并帶動了相關(guān)科學的進步。

2017年，張澤民院士研究組，通過大規(guī)模單細胞測序技術(shù)對肝癌相關(guān)T淋巴細胞進行分析，首次在單細胞水平上描繪肝癌微環(huán)境中免疫細胞圖譜，發(fā)現(xiàn)了肝癌免疫療法的潛在靶點，也為我們從多角度系統(tǒng)性理解肝癌T淋巴細胞特征奠定了基礎。（2017，Cell，Landscape of Infiltrating T Cells in Liver Cancer Revealed by Single-Cell Sequencing）

2024年，復旦大學附屬中山醫(yī)院樊嘉院士和高強教授、中國科學院上海免疫與感染研究所張曉明研究員、浙江大學基礎醫(yī)學院郭國驥教授合作在Science上發(fā)表了題為A blueprint for tumor-infiltrating B cells across human cancers的研究論文，結(jié)合單細胞轉(zhuǎn)錄組、 B細胞受體免疫組庫和表觀基因組的多組學數(shù)據(jù)，系統(tǒng)性地刻畫了腫瘤浸潤性B細胞的異質(zhì)性、動態(tài)分化和表觀調(diào)控機制。創(chuàng)新地揭示了腫瘤微環(huán)境中廣泛存在的EF應答的癌種偏好性、空間定位特征、臨床意義及潛在的誘導調(diào)控機制。

但是，與逐漸成熟的單細胞T/BCR測序不同，空間T/BCR測序測序技術(shù)還一直未能有較好的測序技術(shù)產(chǎn)品去做支撐，成果尚少，現(xiàn)有的文章技術(shù)還局限于使用早期的低分辨率轉(zhuǎn)錄芯片為依托。成熟穩(wěn)定且高分辨率的空間T/BCR測序技術(shù)產(chǎn)品的缺乏限制了空間免疫組的研究。

百創(chuàng)空間全長免疫組庫測序技術(shù)?BMKMANU?S3000-VDJ

2024年12月，百邁客生物智能制造以廣受市場好評的亞細胞級S系列空間轉(zhuǎn)錄組芯片為依托，開發(fā)出了在原片上可同時捕獲3’端轉(zhuǎn)錄組信息以及全長B細胞受體（BCR）和T細胞受體（TCR）序列的空間T/BCR測序技術(shù)產(chǎn)品—BMKMANU?S3000-VDJ?，將填補這一技術(shù)產(chǎn)品的缺口。

實測案例-某腫瘤-百創(chuàng)單細胞級空間免疫組結(jié)果

BMKMANU?S3000-VDJ?技術(shù)，使用新鮮OCT包埋樣本，在分辨率為3.5μm的芯片上同一張組織切片（10μm）實現(xiàn)3’端mRNA，以及全長TCR/BCR的捕獲。利用百邁客生物智能制造獨有的圖像校準及細胞分割技術(shù)，得到單細胞級分辨率的空間轉(zhuǎn)錄組結(jié)果及單細胞級分辨率的空間T/BCR數(shù)據(jù)。

BMKMANU?S3000-VDJ??技術(shù)路線

精準空間細胞注釋

得到的單細胞級空間轉(zhuǎn)錄組結(jié)果，可以進行常規(guī)的空間轉(zhuǎn)錄組分析，并進行精準的細胞注釋。

精準細胞注釋及T/B細胞的空間分布

T/B細胞的亞群定位

對于得到的T細胞及B細胞又可以繼續(xù)進行詳細的亞群分類，同時探討亞群之前的相互轉(zhuǎn)換關(guān)系以及與表型之前的關(guān)系。

T/B Cells 亞群分類，亞群空間分布及亞群發(fā)育軌跡分析

TCR/BCR?空間分布以及豐度分析

TCR和BCR的豐度分析可以揭示免疫反應的多樣性和動態(tài)變化。例如，TCR的多樣性在腫瘤進展過程中會發(fā)生變化，早期肝癌患者的TCR和BCR均勻性更高，而晚期患者則表現(xiàn)出較低的均勻性。此外，TCR和BCR的豐度變化也可以反映免疫細胞的激活狀態(tài)和克隆擴增情況。

克隆型空間分布以及豐度分析

腫瘤樣本我們可以類比為一處具有復雜地貌的特殊地理環(huán)境，不同的環(huán)境造就了各種細胞的不同狀態(tài)，而T/B細胞在不同的“選擇壓力”下邊進行了不同的“適應性進化”。對不同生態(tài)位的T/B細胞尤其是TCR/BCR進行測定，有助于我們?nèi)ソ沂久庖呒毎目寺∑鹪春瓦M化過程。例如，通過分析TCR的VDJ重排，可以追蹤T細胞克隆的起源和擴增過程。這種分析有助于理解免疫細胞在不同生理和病理狀態(tài)下的動態(tài)變化。

百創(chuàng)單細胞級空間全長免疫組產(chǎn)品?BMKMANU?S3000-VDJ，將幫助科研者解決整個轉(zhuǎn)錄組和組織形態(tài)學問題，實現(xiàn)人類腫瘤或其它病變組織中B細胞和T細胞克隆的高保真定位和空間譜系追蹤，將在一定程度上促進對各種臨床相關(guān)現(xiàn)象（如感染、疫苗接種和癌癥）中淋巴細胞空間動力學的理解。

百邁客生物為該研究提供了百創(chuàng)S1000空間轉(zhuǎn)錄組測序服務。

單細胞組學和時空組學是近年來生命科學領域的重要技術(shù)突破，它們在細胞異質(zhì)性解析、動態(tài)過程研究和細胞間相互作用分析方面具有重要優(yōu)勢，為生命科學研究帶來了全新的視角和深度。水稻稻瘟病是世界上發(fā)生嚴重的真菌病害之一，水稻在面臨稻瘟菌侵染時會激活動態(tài)免疫，因此挖掘水稻特異免疫基因?qū)τ诳沟疚敛【秩局陵P(guān)重要。

該研究對稻瘟菌接種后三個時間點的樣品進行了單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序(圖1A)，同時對接種后的水稻葉片也進了時空組測序(圖1B)。

圖1?水稻樣品單細胞及時空組測序流程圖

對測序獲得的單細胞數(shù)據(jù)，結(jié)合細胞特異的標志基因，AddModuleScore?軟件和GO富集分析等方法，對水稻的細胞類型進行了分類注釋(圖2A)?；虮磉_分析發(fā)現(xiàn)，維管細胞中的原形成層細胞在稻瘟菌侵染后高度誘導二萜類植保素合成代謝相關(guān)基因的表達，其中水稻關(guān)鍵植保素momilactone A合成被特異誘導(圖2B)，促進了momilactone A在維管組織中積累，可能是抗稻瘟病的關(guān)鍵因素。相反，激素途徑和模式分子激發(fā)的免疫對抗病性貢獻較弱。

圖2?水稻單細胞測序結(jié)果及差異基因表達分析

共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果顯示，稻瘟菌孢子萌發(fā)后優(yōu)先靶向葉脈入侵，但是水稻的維管組織具有較強的免疫，稻瘟菌菌絲無法進一步侵入(圖3A)。時空組測序結(jié)果顯示，富含亮氨酸重復序列的(NLR)免疫基因的表達在接種24小時后，葉尖部較葉基部具有更強的積累，表明免疫基因的表達具有極性的特征。綜上所述，該項研究揭示了水稻在稻瘟病菌侵染時免疫基因存在細胞特異性和多維(局部和縱向)的表達模式，為挖掘新的免疫基因提供了重要的數(shù)據(jù)基礎(圖3B)。

圖3 ?共聚焦顯微鏡觀察及時空組測序結(jié)果顯示水稻組織存在多維度的免疫

內(nèi)容來源于中國農(nóng)業(yè)大學，侵刪

該研究將空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)應用于小麥籽粒發(fā)育研究，根據(jù)基因表達和位置信息詳細劃分細胞功能亞群，揭示了小麥籽粒發(fā)育過程的空間轉(zhuǎn)錄特征，繪制了小麥籽粒三維基因表達圖譜。

百邁客生物為該研究提供了空間轉(zhuǎn)錄組測序服務。

小麥（Triticum aestivum L.）是全球三大主糧作物之一，種植面積約2.3億公頃，其產(chǎn)量提升對保障全球糧食安全與營養(yǎng)供給至關(guān)重要。小麥籽粒主要由三部分組成：二倍體胚、三倍體胚乳及果皮（種皮）。這些組織在發(fā)育過程中表現(xiàn)出顯著的基因表達時空特異性，形成功能分化的區(qū)室化結(jié)構(gòu)。盡管這些組織在細胞類型和生理功能上存在明顯差異，但它們通過協(xié)同調(diào)控構(gòu)建了獨特的籽粒發(fā)育微環(huán)境，共同決定籽粒的最終表型。然而，目前對籽粒細胞類型的認知仍主要依賴于形態(tài)學觀察和少量標記基因的表達分析，常規(guī)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)因缺乏空間分辨率，極大限制了對籽粒發(fā)育調(diào)控機制的深入解析及關(guān)鍵功能基因的挖掘。

為系統(tǒng)解析小麥籽粒發(fā)育的分子機制，該研究采用時空轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)，構(gòu)建了籽粒在發(fā)育早期4 DAP、8 DAP和12 DAP的高分辨率基因表達圖譜，實現(xiàn)了近8萬個基因的空間表達可視化，并鑒定了10個特征明確的細胞亞群及190個籽粒特異性標記基因。研究發(fā)現(xiàn)，不同組織特異性基因（尤其是轉(zhuǎn)錄因子）呈現(xiàn)動態(tài)表達模式。通過共表達網(wǎng)絡和順式調(diào)控元件分析，鑒定到一個關(guān)鍵調(diào)控因子——轉(zhuǎn)錄因子TaABI3-B1，其在胚胎及胚乳周圍組織中特異性表達，并負向調(diào)控胚胎和籽粒大小。進一步利用等位基因變異體和轉(zhuǎn)基因材料驗證了TaABI3-B1在胚胎和胚乳發(fā)育中的關(guān)鍵作用。

該研究不僅為小麥籽粒發(fā)育提供了全面的時空轉(zhuǎn)錄組資源，還揭示了調(diào)控籽粒大小的新機制，為小麥分子設計育種和產(chǎn)量提升提供了重要理論依據(jù)。

內(nèi)容來源于北京大學現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究院，侵刪

通過對多組學數(shù)據(jù)的深度整合分析，該研究全面探究了重要木本經(jīng)濟植物核桃（Juglans regia）及其近緣種在基因組層面的遺傳變異特征。同時，深入剖析了核桃果實發(fā)育過程中的轉(zhuǎn)錄代謝調(diào)控機制，揭示了表觀遺傳修飾以及空間轉(zhuǎn)錄調(diào)控在其中的關(guān)鍵作用，并對相關(guān)候選基因的功能進行了系統(tǒng)分析。該研究為深入理解核桃果殼基因變異及其網(wǎng)絡遺傳調(diào)控機制提供了全新的視角和理論依據(jù)，為推動核桃分子育種技術(shù)的創(chuàng)新發(fā)展奠定了堅實的基礎。

百邁客生物為該研究提供了植物空間轉(zhuǎn)錄組測序服務。

研究背景

核桃（Juglans regia）是一種具有重要經(jīng)濟價值的堅果油料樹種；其果實具有堅硬的內(nèi)果皮/果殼以保護種子，這在其進化過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用，而果殼厚度是核桃育種的一個重要性狀。然而，與核桃果殼發(fā)育相關(guān)的基因組景觀和基因調(diào)控網(wǎng)絡尚未得到系統(tǒng)的闡明。

研究內(nèi)容

該研究組裝注釋了核桃品種“香玲”的高質(zhì)量基因組，并構(gòu)建了涵蓋八個胡桃屬物種的圖形結(jié)構(gòu)泛基因組，以揭示基因組水平上的遺傳變異。重新測序了285份樣本，揭示了其群體基因組景觀變異圖譜。通過全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS），研究發(fā)現(xiàn)了19個與核桃馴化和改良過程中受到選擇的268多個位點相關(guān)的基因座。

圖1-核桃比較基因組學與遺傳變異分析

圖2-核桃果殼/內(nèi)果皮十一個發(fā)育階段基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡及動態(tài)形態(tài)變化

通過對十一個發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組學、代謝組學、DNA甲基化和空間轉(zhuǎn)錄組學等多組學分析，揭示了多個與次生細胞生物合成和木質(zhì)素積累相關(guān)的候選基因，例如UGP、MYB308、MYB83、NAC043、NAC073、CCoAOMT1、CCoAOMT7、CHS2、CESA7、LAC7、COBL4和IRX12。在擬南芥（Arabidopsis thaliana）中過表達JrUGP和JrMYB308驗證了它們在木質(zhì)素生物合成和細胞壁加厚中的作用。

研究結(jié)論

植物的果實特征，包括核桃（Juglans）的堅硬內(nèi)果皮，在種子傳播、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率和遺傳多樣性方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，其中殼厚對核桃的生產(chǎn)和育種有著顯著影響。綜合多組學分析探究了核桃殼厚度這一關(guān)鍵性狀以及與木質(zhì)素積累和細胞壁增厚相關(guān)的內(nèi)果皮發(fā)育，為木本作物的遺傳學和調(diào)控機制提供了新的見解，助力基于基因組信息的改良育種策略。全面多組學研究結(jié)果為核桃的遺傳變異和內(nèi)果皮發(fā)育及果殼厚度的網(wǎng)絡調(diào)控提供了新的見解，并為核桃品種改良的基因組信息育種策略提供了可能。

圖4-該研究主要發(fā)現(xiàn)概括模型

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